THP-1細胞系是1980年建立的人單核細胞白血病細胞系，從一位患有急性單核細胞白血病的小男孩外周血中分離得到，有分化多種巨噬細胞的能力，被廣泛應用于單核細胞和巨噬細胞的相關機制、免疫和炎癥信號通路等研究。

細胞培養(yǎng)注意事項

1、該細胞凍存后復蘇率較低，凍存時請酌情提高細胞量，凍存時活細胞密度不能低于4×106mL，細胞復蘇后需要培養(yǎng)5-10天后狀態(tài)才能恢復，前一周不要進行離心操作。

2、該細胞對細胞密度較為敏感，培養(yǎng)、傳代時請注意控制細胞密度。

3、頻繁的細胞計數是監(jiān)測THP-1細胞狀態(tài)的最佳方法。

4、當細胞密度達到8×105個活細胞/ mL時需要進行傳代。細胞密度不要超過1×106活細胞/ mL。

5、該細胞為懸浮細胞，在培養(yǎng)時更喜歡溫和處理，培養(yǎng)時盡量少對細胞進行離心處理以此造成對細胞的傷害。換液時不要全培養(yǎng)基更換，傳代時使用半換液法對細胞狀態(tài)較為有利，因此我?guī)旖ㄗh您使用半換液法進行傳代。

6、THP-1細胞中需要添加β-巰基乙醇，現(xiàn)用現(xiàn)配，不可直接添加至完培中長期儲存，會影響β-巰基乙醇的穩(wěn)定性。

7、細胞傳代后細胞內出現(xiàn)黑色小點，細胞間隙內出現(xiàn)少量顆粒物或者培養(yǎng)基中浮游著少量死細胞等均為正常現(xiàn)象，對細胞的增殖及試驗無影響，不建議頻繁離心，最多一周一次。

培養(yǎng)體系

RPMI-1640培養(yǎng)基（BC-M-017）+20%特級胎牛血清（BC-SE-FBS01）+1%青霉素-鏈霉素溶液（BC-CE-007）+0.05mMβ-巰基乙醇

Q&A

Q：什么是半換液法？

A：以T25瓶為例，將培養(yǎng)瓶站立靜置5-10min，肉眼可見細胞沉底，吸2.5mL上清至離心管離心，新鮮培養(yǎng)基重懸后打回原瓶，在原瓶中補充新鮮培養(yǎng)基至5mL。

Tips：THP-1培養(yǎng)時，培養(yǎng)基一定要給充足

Q：細胞貼壁了怎么辦？

A：THP-1培養(yǎng)時有少量貼壁是正?，F(xiàn)象，建議在傳代時只吸取上清換瓶培養(yǎng)?；蛘呖梢允褂貌毁N壁的無菌培養(yǎng)瓶培養(yǎng)。

Q：細胞聚團了怎么辦？

A：少量聚團屬于正?，F(xiàn)象，但較多聚團需要注意，檢查培養(yǎng)箱是否正常、培養(yǎng)體系酸堿性以及血清是否合適，適當更換血清。